細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)技術(shù)是指選用各種細(xì)胞的最佳生存條件對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和研究的技術(shù),是廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域的重要技術(shù)。
一般細(xì)胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng)),所以大多數(shù)培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時(shí),常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。對(duì)大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,以為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。
使用其他pH緩沖體系是否就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了?研究發(fā)現(xiàn),由于空氣中二氧化碳濃度較低,如果不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞,培養(yǎng)基中的HCO3-就會(huì)耗盡,從而干擾細(xì)胞的正常生長。因此,大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞仍然在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
二氧化碳培養(yǎng)箱通過控制周圍環(huán)境條件,為細(xì)胞/組織創(chuàng)造更適宜的生長環(huán)境。條件控制的結(jié)果是一個(gè)穩(wěn)定的環(huán)境:例如恒定的酸堿度(pH:7.2-7.4)、穩(wěn)定的溫度(37°C)、較高的相對(duì)濕度(95%)以及穩(wěn)定的二氧化碳濃度(5%)。 此外,增加了CO2濃度控制,并采用單片機(jī)對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行精確控溫,提高了生物細(xì)胞、組織等培養(yǎng)的成功率和效率。
二氧化碳培養(yǎng)箱中CO2濃度控制:
CO2濃度探測可通過兩種控制系統(tǒng)——紅外傳感器(NDIR)或熱傳導(dǎo)傳感器(TC)進(jìn)行測量。當(dāng)二氧化碳培養(yǎng)箱的門被打開時(shí),CO2從箱體內(nèi)漏出,此時(shí)傳感器就會(huì)探測到CO2濃度的降低,并做出及時(shí)的反應(yīng),重新注入CO2使其恢復(fù)到原先預(yù)設(shè)的水平。熱傳導(dǎo)傳感器(TC)監(jiān)控CO2濃度的工作原理是通過測量兩個(gè)電熱調(diào)節(jié)器(一個(gè)調(diào)節(jié)器暴露于箱體環(huán)境內(nèi),另一個(gè)則是封閉的)之間的電阻變化來實(shí)現(xiàn)的。箱內(nèi)CO2濃度的變化會(huì)改變兩個(gè)電熱調(diào)節(jié)器間的電阻,從而促使傳感器產(chǎn)生反應(yīng)以達(dá)到調(diào)節(jié)CO2水平的作用。TC控制系統(tǒng)的一個(gè)缺點(diǎn)就是箱內(nèi)溫度和相對(duì)濕度的改變會(huì)影響傳感器的精確度。當(dāng)箱門被頻繁打開時(shí),不僅CO2濃度,溫度和相對(duì)濕度也會(huì)發(fā)生很大的波動(dòng),因而影響了TC傳感器的精度。當(dāng)需要精確的培養(yǎng)條件和頻繁開啟培養(yǎng)箱門時(shí),此控制系統(tǒng)就顯得不太適用了。紅外傳感器(NDIR)作為另一個(gè)可選擇的控制系統(tǒng)比TC系統(tǒng)具備更精確的CO2控制能力,它是通過一個(gè)光學(xué)傳感器來檢測CO2水平的。NDIR控制系統(tǒng)包括一個(gè)紅外發(fā)射器和一個(gè)傳感器,當(dāng)箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,傳感器就可以檢測出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對(duì)應(yīng)于箱體內(nèi)CO2的水平,從而可以得出箱體內(nèi)CO2的濃度。因?yàn)镹DIR系統(tǒng)不會(huì)因溫度和相對(duì)濕度的改變而受到影響,所以它比TC系統(tǒng)更精確,特別適用于需要頻繁開啟培養(yǎng)箱門的細(xì)胞培養(yǎng)。然而,此系統(tǒng)比TC系統(tǒng)更貴,這時(shí)就要結(jié)合經(jīng)費(fèi)預(yù)算進(jìn)行考慮了。
1.TC控制系統(tǒng)中熱導(dǎo)傳感器推薦:
荷蘭Xensor熱導(dǎo)式氣體傳感器XEN-3880是通過測量大氣中的電阻來工作的。傳感器通常包括兩個(gè)細(xì)胞,其中一個(gè)細(xì)胞充滿生長室的空氣。另一個(gè)是一個(gè)密封的電池,在受控溫度下包含參考大氣。每個(gè)單元都包含一個(gè)熱敏電阻(熱敏電阻),其電阻隨溫度、濕度和氣體成分而變化。
當(dāng)兩個(gè)電池的溫度和濕度相同時(shí),電阻的差異將測量氣體成分的差異,在這種情況下,反映了室內(nèi)的二氧化碳水平。如果檢測到差異,系統(tǒng)將提示向腔室中添加更多的二氧化碳。

熱導(dǎo)式氣體傳感器的一種表示方法
2.NDIR控制系統(tǒng)中紅外二氧化碳傳感器推薦:
韓國Sensecube 高溫紅外二氧化碳傳感器 KCD-HS800 :
該二氧化碳?xì)怏w傳感器專為高溫可滅菌細(xì)胞培養(yǎng)箱中的二氧化碳濃度控制而設(shè)計(jì)。
其檢測原理采用雙波長NDIR傳感器技術(shù),是韓國率先研發(fā)并實(shí)現(xiàn)商業(yè)化的產(chǎn)品。
與典型的單波長傳感器不同,這種雙波長傳感器能有效減少因時(shí)間變化及外部溫度影響而導(dǎo)致的測量誤差,從而確保長期數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。
通過精密的校準(zhǔn)和檢測流程,該傳感器具備了出色的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
適用于測試設(shè)備、二氧化碳培養(yǎng)箱、細(xì)胞培養(yǎng)箱以及環(huán)境監(jiān)測與控制系統(tǒng)。
韓國Sensecube CO2傳感器探頭(1%、10%、20%) KCD-HP 描述:
與NDIR單類型傳感器不同,我們的二氧化碳?xì)怏w傳感器僅有微小的偏差,因此具備出色的長期穩(wěn)定性。
通過復(fù)雜的工藝和技術(shù)進(jìn)行測試和校準(zhǔn),確保了其高穩(wěn)定性和精確度。
該傳感器易于應(yīng)用于各種場景,如檢測設(shè)施、細(xì)胞培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)室、環(huán)境控制系統(tǒng)及環(huán)境監(jiān)測系統(tǒng)等。
NDIR類型傳感器利用光學(xué)特性來檢測二氧化碳?xì)怏w。我們?cè)O(shè)計(jì)了專門的控制器,以防止設(shè)備受到?jīng)_擊和振動(dòng)的影響。
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NDIR紅外傳感器和TC熱傳導(dǎo)傳感器在二氧化碳培養(yǎng)箱中CO2濃度控制的區(qū)別
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