澳門大學(xué)微電子研究院的研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一種新型的DNA擴(kuò)增增強(qiáng)劑,可以使反應(yīng)信號(hào)強(qiáng)度提高10倍,從而為肉眼觀察新冠病毒等的核酸檢測結(jié)果、方便可攜式快速病毒檢測、以及實(shí)現(xiàn)大規(guī)模人群篩查鋪平了道路。相關(guān)研究成果獲國際知名期刊《芯片實(shí)驗(yàn)室》(Lab on a chip)刊登,并被選為當(dāng)期背面封面文章。
基于高敏感度、高效率和較低的成本的優(yōu)點(diǎn),雙鏈DNA結(jié)合染料長久以來作為雙鏈DNA指示劑被廣泛應(yīng)用于DNA擴(kuò)增中。隨著分子診療領(lǐng)域的技術(shù)進(jìn)步,對(duì)DNA指示劑的要求也隨之提高:能夠提供更詳盡的核酸序列信息,能夠穩(wěn)定應(yīng)用于微流控芯片上微米乃至納米量級(jí)的反應(yīng)體系中等等。然而,雙鏈DNA結(jié)合染料在高濃度下對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)的抑制極大地限制了其在核酸檢測分析技術(shù)中的廣泛應(yīng)用。因此,研究團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)并優(yōu)化了一種名為CRoA的擴(kuò)增增強(qiáng)劑來消除雙鏈DNA結(jié)合染料在應(yīng)用中的缺陷。通過擴(kuò)增反應(yīng)增強(qiáng)策略,相關(guān)領(lǐng)域的科研人員能夠更便利地在傳統(tǒng)試管中以及在微流控芯片上使用雙鏈DNA結(jié)合染料作為核酸指示劑。
研究團(tuán)隊(duì)表示,在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中加入CRoA增強(qiáng)劑還能夠極大地拓展核酸染料的應(yīng)用范圍。例如,低成本核酸染料SYBR Green在高解析度熔解曲線分析、肉眼觀察擴(kuò)增結(jié)果、微流控芯片定性檢測DNA等技術(shù)中的應(yīng)用將由不可能變?yōu)榭赡?。這是對(duì)所有核酸擴(kuò)增反應(yīng)都適用的一項(xiàng)技術(shù)創(chuàng)新,包括用于新冠病毒、流感、細(xì)菌感染、寄生蟲感染等核酸檢測。例如因?yàn)闄z測信號(hào)的螢光強(qiáng)度的大幅度增加,使得反應(yīng)結(jié)果可以肉眼觀察,大大降低了對(duì)光學(xué)檢測設(shè)備的要求,方便用于可攜式快速病毒檢測,實(shí)現(xiàn)大規(guī)模人群篩查。相關(guān)發(fā)明具有較大的應(yīng)用潛力,已經(jīng)申請(qǐng)了美國專利以及中國專利。
該項(xiàng)研究獲澳門特別行政區(qū)科學(xué)技術(shù)發(fā)展基金、澳大研究基金以及達(dá)安基因的聯(lián)合支持。澳大助理教授賈艷偉為文章的通訊作者,博士研究生沈韌為文章的第一作者,澳大教授馬許愿和麥沛然亦為該研究作出重要貢獻(xiàn)。
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