引言

結(jié)晶作為API生產(chǎn)的最后一道工序，除了用于純化外，還可以實現(xiàn)晶型與粒度控制。晶型和粒度影響口服藥物生物利用度。其中，粒度分布(PSD)是一個重要的粉體性質(zhì)，它影響晶漿的過濾速率、濾餅的干燥效率、原輔料混合、制粒和壓片等下游工藝。產(chǎn)品的粒度與結(jié)晶過程諸多控制條件有關，包括過飽和度、溶劑體系、雜質(zhì)種類與含量、晶種比表面積、晶種點、攪拌強度與反應釜內(nèi)流體力學等，在過程控制中需要綜合考慮。在實驗室規(guī)模完成工藝優(yōu)化實現(xiàn)粒度控制后，結(jié)晶工藝在生產(chǎn)規(guī)模的表現(xiàn)備受考驗。此外，對于無法避免的油析現(xiàn)象，在其結(jié)晶過程中的粒度調(diào)控又會采用什么樣的策略。本文將對以上內(nèi)容進行討論。

影響粒度的工藝參數(shù)

粒數(shù)衡算是粒度控制的理論基礎。粒數(shù)衡算模型會在后文提及，這里用較為簡單的方式理解粒數(shù)衡算即為一張餅(一定的初始濃度)給多少人分(顆粒數(shù))，他們能長胖(大粒度)還是會變瘦(小粒度)。即在一定的初始濃度下，如果成核數(shù)多，則產(chǎn)品的粒度??；成核少，產(chǎn)品的粒度大。工藝參數(shù)對產(chǎn)品粒度的影響，總結(jié)于下表。

結(jié)晶工藝參數(shù)通過影響過飽和度、二次成核、晶體生長和體系顆粒數(shù)等使產(chǎn)品粒度分布產(chǎn)生差異。結(jié)晶是由成核和生長組成的，高過飽和度意味著初級和二次成核占據(jù)主導，產(chǎn)生更多顆粒，從而粒度變小。產(chǎn)生高過飽和度的結(jié)晶參數(shù)有高起始濃度、低溫或高反溶劑比例下加晶種，快速冷卻與快速滴加反溶劑等。在高過飽和度下制備的小顆粒產(chǎn)品一般情況下晶體生長不夠完善，可能會存在表面粗糙的問題從而形成團聚物。低過飽和度成核速率慢，會得到較大粒度的晶體。工藝參數(shù)的調(diào)控正好相反，故在此不做贅述。從控制的角度出發(fā)，API的結(jié)晶工藝更傾向選擇加晶種。晶種提供的比表面積對產(chǎn)品粒度的影響分為兩種情況。仍存在二次成核，但更大的晶種量和小粒度晶種可以一定程度抑制二次成核，使終點晶核數(shù)量降低，最終產(chǎn)品粒度大。若晶種提供的比表面積足夠多，導致體系不存在二次成核，那么通過粒數(shù)衡算可知，晶種越多，產(chǎn)品的粒度越小。通常第一種情況更為常見。粗料帶進結(jié)晶體系的雜質(zhì)和結(jié)晶溶劑有時會與晶面作用，通過影響晶體生長和生長方向改變晶體的粒度和晶體形貌。這種情況需要具體分析，后文有案例說明。總之對于一定濃度的結(jié)晶體系，決定產(chǎn)品粒度大小的關鍵因素是結(jié)晶終點的顆粒數(shù)。

通過后處理，減小粒度

如前文所述，為了實現(xiàn)工藝控制和讓晶體更完整的生長，一般會選擇在低過飽和度下讓結(jié)晶工藝穩(wěn)健進行。在放大中，由于攪拌能量與湍流程度一般會低于小試，預期會得到相比于實驗室規(guī)模更大粒度的產(chǎn)品。這種情況會選擇后處理的方式減小粒度獲得符合目標粒度分布的產(chǎn)品。與氣流粉碎相比，在結(jié)晶體系中對引流的晶漿使用超聲和濕磨更易得到均勻的顆粒。雖然氣流粉碎也可以通過調(diào)控進料速度，進料和粉碎壓力實現(xiàn)粒度控制，但過程中缺少在線監(jiān)控和實時調(diào)控。這些在超聲和濕磨過程中都可以實現(xiàn)。示意圖如下。案例1通過在小反應釜超聲的方法將片狀的大顆粒打碎成不規(guī)則小顆粒，隨后在大反應釜中通過反復升降溫得到粒度均一并且形貌更為規(guī)則的小粒度產(chǎn)品。特別注意案例2，它不僅降低了粒度還改變了晶體形貌，操作的關鍵點是反復交替使用濕磨和升降溫。

這種溶解-晶體生長實現(xiàn)粒度控制的方法較為常見，尤其是針對PSD出現(xiàn)雙峰的情況。對于復雜項目，需要綜合運用反復升降溫與濕磨/超聲。其中對于溶解度隨溫度變化不大的體系，可以嘗試良溶劑和反溶劑反復滴加。對于溶劑的要求為：良溶劑期待高溶解度，反溶劑低溶解度，以降低溶劑體積。另外在溶劑溶解度有限的情況下，也可以嘗試滴加高溫良溶劑和低溫反溶劑。對于下圖這個案例，良溶劑和反溶劑反復滴加可以降低小粒度，增加大顆粒的體積分數(shù)。另外對于溶解度低的化合物，可以嘗試DCM、丙酮和EA與醇的組合增加溶解度，降低溶劑體積，提升PMI。

小試DoE建立用于生產(chǎn)粒度控制的經(jīng)驗模型

研究思路如下：

使用前提為在實驗室配置與生產(chǎn)規(guī)模反應釜和攪拌槳等比例縮小的設備。車間控溫系統(tǒng)與小試傳熱效率相當，設定溫度、夾套溫度和反應釜內(nèi)溫隨時間的變化曲線在生產(chǎn)和小試規(guī)模應基本一致。用加晶種的批次結(jié)晶舉例說明，實驗變量為晶種大小，晶種量和攪拌速率。

在實驗室需要優(yōu)先開發(fā)基礎結(jié)晶工藝，在小規(guī)模得到晶型、粒度分布、純度、殘留溶劑、收率等指標合格的產(chǎn)品。隨后在小規(guī)模對試驗變量設計DoE試驗，用得到的數(shù)據(jù):產(chǎn)品粒度分布、轉(zhuǎn)速、晶種粒度分布和晶種量擬合經(jīng)驗模型得到模型參數(shù)a-e?？紤]到粒度分布，此模型應為曲面。在實驗變量范圍內(nèi)，改變晶種大小、晶種量和轉(zhuǎn)速做三組試驗，檢驗模型預測粒度分布的準確性。

隨后在中試規(guī)模分別用能量和線速度計算攪拌轉(zhuǎn)速，進行兩組試驗，將粒度分布結(jié)果與預測值對比，從而選擇轉(zhuǎn)速計算方式。根據(jù)目標粒度分布通過經(jīng)驗模型計算和設計放大規(guī)模需要使用的攪拌槳轉(zhuǎn)速、晶種量和晶種大小，進行1-2組中試規(guī)模的驗證試驗。通過試驗結(jié)果與預測數(shù)據(jù)的偏差，調(diào)整試驗變量，從而實現(xiàn)大規(guī)模產(chǎn)品粒度控制。

放大結(jié)晶與小試相比，總質(zhì)量/傳熱表面積明顯增加，導致傳熱效率降低，釜壁產(chǎn)生溫差后結(jié)晶形成晶疤。對于這種情況選擇梯度降溫、設置等溫攪拌程序、或夾套小幅度回溫可以解決。另外還需要關注反應釜材料和化合物氫鍵受體數(shù)量。比如玻璃反應釜容易和氫鍵受體多的化合物形成氫鍵產(chǎn)生晶疤。對于這種情況，在溶劑體系中加入長鏈醇如正丁醇提供氫鍵供體，減少化合物與反應釜壁形成氫鍵的可能性方可解決晶疤問題。

運用粒數(shù)衡算模型預測放大規(guī)模產(chǎn)品粒度分布

研究對象為冷卻和溶析耦合的加晶種間歇結(jié)晶，因此運用簡化的一維粒數(shù)衡算方程建立模型，如下圖所示。其中母液濃度、顆粒數(shù)與粒度隨時間的變化通過在線紅外和FBRM獲得。使用兩步生長模型計算生長速率。其中溶解度隨溫度和溶劑比例的變化曲面回歸得到計算模型。攪拌功率、攪拌槳尺寸、溶劑密度和粘度等參數(shù)體現(xiàn)在生長速率模型中。此外計算方程還考慮了晶體破碎而造成的二次成核。研究思路為先在小試規(guī)模收集溶解度、濃度、粒度和顆粒數(shù)等數(shù)據(jù)。隨后選擇合適的模型回歸得到動力學參數(shù)。最后通過模型計算放大規(guī)模下濃度、成核速率與生長速率隨時間的變化，最終預測產(chǎn)品的粒度分布。

油析結(jié)晶粒度控制

通常油析需要通過更換溶劑體系、降低母液起始濃度和調(diào)控工藝參數(shù)在結(jié)晶過程中規(guī)避掉。但對于一些化合物，尤其是研發(fā)早期低純度的物料，油析很難避免。那么對于不貼壁流動性較好的油相，可以充分利用它做粒度控制。方法如下圖所示。低攪拌速率下將在結(jié)晶體系中得到大油滴。由于它具有較大的體積，溶質(zhì)碰撞頻次和幾率提升，更容易發(fā)生初級成核，因此在此階段得到更多顆粒，粒度小。晶核在晶體生長過程中，在油滴內(nèi)部發(fā)生擴散，API從高濃度擴散至低濃度的晶體表面，由于油滴相濃度高和流動性差的特點API在擴散過程易中發(fā)生二次成核。因此對于油析結(jié)晶，低攪拌轉(zhuǎn)速得到大油滴，使產(chǎn)品粒度降低。而高轉(zhuǎn)速，得到小油滴，產(chǎn)品粒度增加。這是因為小油滴的體積限制使初級成核速率降低，因此只能得到少量的晶核。在隨后的結(jié)晶過程中，由于較小的油滴體積，晶核更大概率被排到連續(xù)相中。油滴吸附在晶核表面完成晶體生長，最終得到大粒度產(chǎn)品。對于一些化合物，油析結(jié)晶得到的粒度分布有時可以到達均相結(jié)晶做不到的粒度范圍。

通過下圖幫助理解油析結(jié)晶。油析是指由溶劑比例、母液濃度、雜質(zhì)等產(chǎn)生的液液分層(LLPS)現(xiàn)象。LLPS曲線可以通過配置飽和液以一定速率降溫檢測。對于一定投料量的油析結(jié)晶，API會在油相和連續(xù)相分配。當良溶劑比例增加時，連續(xù)相中API比例變多，油相API比例減少。在結(jié)晶初始階段，油相先發(fā)生初級成核，濃度沿著LLPS曲線下降。一段時間后連續(xù)相發(fā)生成核與晶體生長，連續(xù)相的濃度降低。隨著結(jié)晶的推進，化合物從油相逐漸擴散至連續(xù)相，提升連續(xù)相的濃度，直至油相消失。最后形成連續(xù)相，油析結(jié)晶轉(zhuǎn)化為均相結(jié)晶。油析結(jié)晶過程中，油相的溶劑比例決定晶體形貌和長徑比。此外更大比例的良溶劑，使API在連續(xù)相的分配增加，因此導致連續(xù)相中初級和二次成核變多，最終產(chǎn)生更多的小顆粒，降低產(chǎn)品粒度，并且粒度分布容易形成雙峰。

結(jié)語

本文匯總了均相結(jié)晶與油析結(jié)晶粒度控制方法與策略以及從小試到放大規(guī)模粒度控制預測和調(diào)控，僅以此拋磚引玉，給讀者提供解決問題的方法和思路。