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OPM光片技術(shù)在海葵活體成像中的應(yīng)用

jf_64961214 ? 來源:jf_64961214 ? 作者:jf_64961214 ? 2025-12-23 06:51 ? 次閱讀
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圖1:? 使用Kinetix sCMOS相機(jī)拍攝的????Nematostella)運(yùn)動動畫(頂部)與圖像拼接圖(底部)?。圖像以兩秒間隔采集,比例尺已標(biāo)注。從圖像序列中可觀察到?收縮波的運(yùn)動過程?。本圖引自參考文獻(xiàn)Singh et al. 2022。

背景介紹

羅里·鮑爾博士(Dr. Rory Power)是位于海德堡的歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室(EMBL)總部先進(jìn)成像中心的一名科學(xué)家兼工程師。他參與了多項(xiàng)研究項(xiàng)目,并負(fù)責(zé)指導(dǎo)參與定制光片顯微成像系統(tǒng)開發(fā)的博士生。

鮑爾博士對其光片成像系統(tǒng)作了如下描述:“這是一臺斜平面顯微鏡(OPM),它采用單一物鏡設(shè)計(jì),使我們能夠在更傳統(tǒng)的倒置式落射熒光顯微鏡配置下開展光片顯微成像,同時(shí)減少對樣本幾何形狀的限制,并可使用水浸物鏡?!?/p>

“該系統(tǒng)用于對‘小觸手怪’???Nematostella)進(jìn)行成像研究。這類生物在形態(tài)學(xué)和行為學(xué)上具有重要研究價(jià)值,其肌肉液壓系統(tǒng)與神經(jīng)動力學(xué)如何影響發(fā)育和運(yùn)動模式是核心科學(xué)問題。我們利用光片顯微技術(shù),觀察這些動物體內(nèi)收縮波的運(yùn)動過程。”

挑戰(zhàn)?

鮑爾博士向我們講述了他在成像工作中面臨的挑戰(zhàn):“????Nematostella)無法被固定?,這些是完全成熟的動物,需要自由活動并表現(xiàn)出自然行為。樣本在液滴中自由移動,我們只能在它們進(jìn)入相機(jī)視野時(shí)進(jìn)行成像。此外,我們需要高速成像以捕捉動態(tài)運(yùn)動,同時(shí)保持大視野(FOV)?!?/p>

除了上述問題,?海葵對光敏感?,這意味著需要采用低光照明模式,導(dǎo)致信號水平降低,因此需要高靈敏度相機(jī)。由于??某叽巛^小(長約1.5毫米,寬約200微米),?只有當(dāng)其身體軸處于特定方向時(shí)才能用光片成像?,這進(jìn)一步要求使用大視野以增加有效成像機(jī)會。

最后,?為了進(jìn)一步擴(kuò)大視野,需使用低倍率物鏡?,但這類物鏡的數(shù)值孔徑(NA)較低,在OPM(斜平面顯微鏡)成像模式下會帶來挑戰(zhàn)。

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?Kinetix相機(jī)的高速性能和大尺寸芯片使其成為我們成像應(yīng)用的理想選擇。?——羅里·鮑爾博士

?解決方案?

?Kinetix相機(jī)?是這一成像應(yīng)用的理想解決方案,其兼具?29毫米超大視野(FOV)?與?全傳感器范圍500幀/秒(fps)的超高速度?。該相機(jī)廣泛應(yīng)用于光片顯微成像領(lǐng)域,使研究人員無需再在性能上妥協(xié)。

鮑爾博士分享了他使用Kinetix相機(jī)的體驗(yàn):“?Kinetix的高速性能與大尺寸芯片使其成為我們應(yīng)用的理想選擇?。目前,在近期實(shí)驗(yàn)中,我們甚至尚未完全發(fā)揮其最高速度,可輕松實(shí)現(xiàn)5倍提速?!?/p>

“軟件設(shè)置完美適配觸發(fā)式圖像采集,運(yùn)行流暢無任何問題。將相機(jī)接入系統(tǒng)硬件的過程也十分簡便?!?/p>

?Kinetix sCMOS相機(jī)?憑借更優(yōu)性能,取代了此前用于校準(zhǔn)/測試的傳統(tǒng)sCMOS相機(jī),實(shí)現(xiàn)了?大視野范圍內(nèi)的高分辨率成像,同時(shí)保持高速采集能力?。

審核編輯 黃宇

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