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共聚焦顯微鏡與熒光顯微鏡有何區(qū)別?

蘇州光子灣科學(xué)儀器有限公司 ? 2025-10-23 18:05 ? 次閱讀
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在現(xiàn)代微觀分析檢測技術(shù)體系中,共聚焦顯微鏡與熒光顯微鏡是支撐材料科學(xué)、工業(yè)質(zhì)檢及生命科學(xué)領(lǐng)域的核心成像工具。二者均以熒光信號(hào)為檢測基礎(chǔ)實(shí)現(xiàn)特異性標(biāo)記成像,但光學(xué)設(shè)計(jì)、性能指標(biāo)及應(yīng)用場景的差異,決定了其在不同研究與生產(chǎn)需求中的適配性。下文,光子灣科技將厘清兩類設(shè)備技術(shù)的區(qū)別,助力提升微觀分析效率與數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。



#Photonixbay.

工作原理的差異

1.共聚焦顯微鏡的工作原理

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共聚焦顯微鏡原理圖

以“點(diǎn)照明- 點(diǎn)探測” 為核心,從物理層面解決離焦光干擾:激光被聚焦為樣品焦平面上的衍射極限光點(diǎn),通過掃描裝置逐點(diǎn)掠過樣品;同時(shí)在探測器前方設(shè)共軛針孔(與照明點(diǎn)焦點(diǎn)共面),該針孔僅允許焦平面光線通過,而焦平面外的離焦光線因偏離焦點(diǎn)被大量阻擋。此機(jī)制可獲取小于1 微米的極薄光學(xué)切片,沿Z 軸逐層掃描后,即可重建樣品精確三維結(jié)構(gòu)。

2.熒光顯微鏡的工作原理

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熒光顯微鏡原理圖

采用“全局照明” 模式:以特定波長激發(fā)光全域照射樣品,激發(fā)熒光團(tuán)發(fā)射長波長光,光路由激發(fā)濾光片、二向色鏡、發(fā)射濾光片構(gòu)成,結(jié)構(gòu)簡單。但該方式會(huì)同時(shí)激發(fā)焦平面內(nèi)外的熒光團(tuán),離焦光信號(hào)與目標(biāo)信號(hào)被探測器一并接收,導(dǎo)致圖像背景模糊、信噪比下降,厚樣品成像時(shí)問題更突出。



#Photonixbay.

成像質(zhì)量與分辨能力的比較

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共聚焦顯微鏡與熒光顯微鏡的成像區(qū)別

1.共聚焦顯微鏡:

更高的分辨率與信噪比:由于有效消除了離焦光的干擾,其圖像的橫向與軸向分辨率均優(yōu)于熒光顯微鏡,背景干凈,細(xì)節(jié)銳利。

三維成像與分析能力:“光學(xué)切片”能力使其能夠?qū)駱颖具M(jìn)行非侵入式的光學(xué)斷層掃描。這對于研究三維結(jié)構(gòu)、組織形態(tài)、材料三維形貌等至關(guān)重要,可進(jìn)行體積、表面積、共定位率等精確量化分析。

深層成像能力:點(diǎn)掃描與針孔濾波機(jī)制在觀察一定厚度(數(shù)十至上百微米)的樣品時(shí),優(yōu)于熒光顯微鏡的清晰度。

2.熒光顯微鏡:

成像質(zhì)量稍差:在觀測厚樣本時(shí)圖像背景模糊,信噪比顯著下降。

無法三維成像:本身不具備光學(xué)切片能力。雖然可通過計(jì)算去卷積算法進(jìn)行后期處理來提升二維圖像的清晰度,但這是一種依賴于算法模型的數(shù)字補(bǔ)救措施,其效果和準(zhǔn)確性無法等同于共聚焦顯微鏡在物理層面獲取的三維信息。



#Photonixbay.

結(jié)構(gòu)與成本的區(qū)別

共聚焦顯微鏡:由于需要激光光源和精密的掃描機(jī)制,通常結(jié)構(gòu)更復(fù)雜、成本更高。

熒光顯微鏡結(jié)構(gòu)簡單、成本較低,因此在廣泛的應(yīng)用場景中更易獲取。



#Photonixbay.

應(yīng)用場景適配性的劃分

1. 共聚焦顯微鏡

在多工業(yè)領(lǐng)域發(fā)揮關(guān)鍵作用。半導(dǎo)體領(lǐng)域檢測晶圓微缺陷與電路精度;鋰電領(lǐng)域觀察電極極片微觀結(jié)構(gòu);光伏領(lǐng)域評估電池片鍍膜均勻性;顯示領(lǐng)域排查面板像素異常;還助力智能制造質(zhì)檢、3C 產(chǎn)品微組件檢測、航空航天材料微觀損傷觀察,及高端制造、精密加工中的尺寸測量與結(jié)構(gòu)驗(yàn)證,是工業(yè)微觀質(zhì)控核心工具。

2. 熒光顯微鏡

廣泛用于對細(xì)胞、組織或材料內(nèi)的特定蛋白質(zhì)或結(jié)構(gòu)進(jìn)行成像,尤其是當(dāng)這些目標(biāo)被熒光染料或熒光蛋白標(biāo)記后。

共聚焦顯微鏡與熒光顯微鏡是滿足不同領(lǐng)域?qū)哟涡枨蟮募夹g(shù)。共聚焦顯微鏡通過其獨(dú)特的光學(xué)設(shè)計(jì),提供了更優(yōu)的分辨率、三維成像分析能力圖像質(zhì)量,成為精密工業(yè)測量和材料分析的關(guān)鍵工具。而熒光顯微鏡則以其經(jīng)濟(jì)、快速的特點(diǎn),應(yīng)用在薄樣本觀察、快速篩查和常規(guī)檢測中。在選用時(shí),應(yīng)綜合考慮研究目標(biāo)對分辨率、三維信息、成像速度等具體要求。




#Photonixbay.

光子灣3D共聚焦顯微鏡

光子灣3D共聚焦顯微鏡是一款用于對各種精密器件及材料表面,可應(yīng)對多樣化測量場景,能夠快速高效完成亞微米級形貌和表面粗糙度的精準(zhǔn)測量任務(wù),提供值得信賴的高質(zhì)量數(shù)據(jù)。

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超寬視野范圍,高精細(xì)彩色圖像觀察

提供粗糙度、幾何輪廓、結(jié)構(gòu)、頻率、功能等五大分析技術(shù)

采用針孔共聚焦光學(xué)系統(tǒng),高穩(wěn)定性結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)

提供調(diào)整位置、糾正、濾波、提取四大模塊的數(shù)據(jù)處理功能

光子灣共聚焦顯微鏡以原位觀察與三維成像能力,為精密測量提供表征技術(shù)支撐,助力從表面粗糙度與性能分析的精準(zhǔn)把控,成為推動(dòng)多領(lǐng)域技術(shù)升級的重要光學(xué)測量工具。

#共聚焦顯微鏡#三維形貌表征#3d顯微鏡#表面粗糙度#三維成像

感謝您本次的閱讀光子灣將持續(xù)為您奉上更多優(yōu)質(zhì)內(nèi)容,與您共同進(jìn)步。

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