美國加州理工學(xué)院的研究項目可能會對動物行為帶來新的認知。

光片神經(jīng)探針植入桿狀物的光學(xué)顯微鏡圖像（間距為141微米），納米光子光柵在桿狀物上發(fā)光形成光片（圖片來源：加州理工學(xué)院）

光片熒光顯微鏡（LSFM）通過薄平面照明方式，限制射向脆弱生物組織樣本的光強度。

這種方式通常是通過聚焦元件，直接由外部激光束產(chǎn)生激發(fā)光光片，但涉及到的光學(xué)元件可能無法對較大的活體樣本或?qū)ψ匀环峭该鞯膭游锍上瘛?/p>

據(jù)麥姆斯咨詢介紹，微型發(fā)光元件是提高光片熒光顯微鏡適用性的關(guān)鍵因素，美國加州理工學(xué)院（California Institute of Technology，簡稱：Caltech）領(lǐng)導(dǎo)的研究團隊現(xiàn)已開發(fā)出了小型神經(jīng)探針，可以植入動物的大腦中并產(chǎn)生適合用于熒光成像的激發(fā)光。這項研究發(fā)表在Neurophotonics期刊上。

該研究團隊在其論文中指出：“通過在大腦任意深處植入元件來產(chǎn)生光片，同時最大程度地減少組織移位，并保持與普通光片成像系統(tǒng)的兼容性，這仍然是一項未克服的艱巨挑戰(zhàn)。我們使用晶圓級納米光子技術(shù)突破了這項挑戰(zhàn)，實現(xiàn)了無需額外微光學(xué)元件的可植入硅基光片光子神經(jīng)探針?！?/p>

該探針使用納米光子光柵耦合器組，周期性的蝕刻結(jié)構(gòu)已經(jīng)用于包括硅光子學(xué)在內(nèi)的應(yīng)用，在某些方向上衍射耦合光波，以創(chuàng)建一系列光波導(dǎo)。

根據(jù)論文描述，加州理工學(xué)院將其光柵耦合器集成到3毫米長、50到92微米厚的可植入的薄硅桿上，其錐度從82到60微米，逐漸變細，并且末端有尖銳的尖端。探針的設(shè)計適合在標準晶圓代工廠制造，以實現(xiàn)最終的擴展及大批量生產(chǎn)。

光片熒光顯微鏡技術(shù)的新突破

在實驗中，這種探針首先被用于成像懸浮在瓊脂中的熒光珠，然后是體外組織樣本，最后是體內(nèi)腦組織。對于體內(nèi)腦組織，使用了團隊最后設(shè)計的模型，光片神經(jīng)探針插入的最大深度為200微米，并形成一定角度，使光片大致平行于大腦表面。

“這些探針具有5至10個可尋址的薄片，薄片平均厚度低于16微米，在自由空間中的傳播距離可達300微米?！闭撐闹忻枋觯澳X組織中的成像區(qū)域高達240 x 490微米。”

該探針的形狀和照明的幾何形狀最終應(yīng)可以與梯度折射率（GRIN）透鏡內(nèi)窺鏡和微型顯微鏡集成，從而有可能使光片熒光顯微鏡探測到比當前項目已驗證深度更深的大腦組織。

它們也可以很容易地與目前正在開發(fā)的一種新型植入式神經(jīng)探針兼容，該探針包含光電探測器陣列，其中單光子雪崩二極管（SPAD）和片上轉(zhuǎn)換器可以將成像架構(gòu)集成到單個CMOS集成電路中。

“這種可在大腦內(nèi)產(chǎn)生光片的新型可植入光子神經(jīng)探針技術(shù)，克服了許多在神經(jīng)系統(tǒng)科學(xué)實驗中使用光片熒光成像的限制?！奔又堇砉W(xué)院的Wesley Sacher說，“我們預(yù)測，這項技術(shù)將帶來光片顯微鏡的新突破，用于自由活動動物的大腦深部成像和行為實驗。”

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